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Luminescent Cell Viability Detection Kit

CBPH0004

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產(chǎn)品描述
產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫
Luminescent Cell Viability Detection Kit

      Luminescent Cell Viability Detection Kit 是通過對 ATP 進(jìn)行定量來測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞 數(shù)目的一種快速均質(zhì)檢測方法。ATP 是活細(xì)胞新陳代謝的關(guān)鍵指標(biāo)。與傳統(tǒng)的 MTT 比色法 不同,這種基于高靈敏度生物發(fā)光方法的檢測技術(shù),不受化合物自發(fā)熒光的影響,極大的壓 縮了操作時間和提高了檢測的靈敏度。

      ATP生物發(fā)光技術(shù)原理:熒光素酶以熒光素、三磷酸腺苷(ATP)和O2為底物,在Mg2+存在時,將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。 發(fā)光值與ATP量成正比,而ATP又和活細(xì)胞數(shù)正相關(guān),因此可通過檢測ATP含量得細(xì)胞活力。

 



Figure 1.  ATP生物發(fā)光技術(shù)原理

產(chǎn)品組分

貨號

CBPH0004-1

CBPH0004-2

CBPH0004-3

CBPH0004-4

規(guī)格

100 points

1000 points

5000 points

10000 points

組分

1 bottle
10 mL/bottle

1 bottle
100 mL/bottle

5×CBPH0004-2

10×CBPH0004-2

 
數(shù)據(jù)展示

1.發(fā)光強(qiáng)度

Figure 2. 不同細(xì)胞發(fā)光強(qiáng)度的檢測。各種細(xì)胞細(xì)胞數(shù)在3-6萬。

2. 半衰期
 

Figure 3. 生物發(fā)光穩(wěn)定性的檢測。分別使用Luminescent Cell Viability Detection Kit和進(jìn)口P公司同類對照對2萬個/孔CTLL-2細(xì)胞(左圖)和5萬個/孔UC-MSC細(xì)胞(右圖)進(jìn)行持續(xù)3小時的生物發(fā)光強(qiáng)度檢測。

3. 線性
Figure 4. 比較不同細(xì)胞數(shù)的線性范圍。分別使用Luminescent Cell Viability Detection Kit和進(jìn)口P公司同類對照檢測不同數(shù)量CHO-K1細(xì)胞(CD-CHO培養(yǎng)基)在黑色96孔板中生物發(fā)光強(qiáng)度,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4. 減半使用

Raji細(xì)胞

Luminescent Cell Viability Detection Kit

進(jìn)口P品牌

國產(chǎn)V品牌

國產(chǎn)R品牌

正常添加(100μL試劑+100μL細(xì)胞)

63881

46128

46089

46032

半量添加(50μL試劑+100μL細(xì)胞)

86513

58588

60229

65135


5. 實(shí)際應(yīng)用——腫瘤藥物篩選

Figure 5. 分別用Luminescent Cell Viability Detection Kit和進(jìn)口P公司產(chǎn)品檢測阿霉素殺傷SW620細(xì)胞的IC50。


Figure 6. 分別用Luminescent Cell Viability Detection Kit、進(jìn)口P公司和國產(chǎn)R品牌產(chǎn)品檢測順鉑殺傷SK-OV-3細(xì)胞的IC50情況。
 
 
Protocol  

1.檢測試劑的準(zhǔn)備 
使用前將本品在4 ℃或室溫下融化。(請勿在超25℃以上進(jìn)行融化,避免活性減弱)
試劑平衡至室溫后,輕柔顛倒混勻試劑。 
 
2.細(xì)胞活力檢測 
·檢測試劑和測試細(xì)胞樣本,室溫放置30min,平衡至室溫。 
·向測試細(xì)胞樣本中加入等體積的檢測試劑。 
·96孔板檢測體系,100 μL培養(yǎng)基中加入100 μL檢測試劑。 
·在測量前1200轉(zhuǎn)震蕩5分鐘,充分震蕩會使效果更好。
·室溫放置10 min以穩(wěn)定發(fā)光信號,即可進(jìn)行檢測。 
 
3. Notes
·96孔板細(xì)胞培養(yǎng)體系中,100 μL/孔細(xì)胞與等體積的該試劑反應(yīng),總體積為 200 μL。 
·避免多次反復(fù)凍融。

 
 
Product Information 

Intended Use

Research Use Only

Unit Size

100 points/1000 points/5000 points/10000 points

Storage

-80℃~-20℃

 

 

 

Expiry

12 months from the date of manufacture

 

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